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導(dǎo) 航

蛋白組學(xué)

修飾蛋白組學(xué)

磷酸化修飾蛋白組學(xué)項(xiàng)目流程

蛋白磷酸化是最重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式之一, 磷酸化修飾具有簡單、靈活、可逆的特性是真核細(xì)胞中常見的調(diào)控手段。磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)（Phosphoproteomics）就是針對(duì)磷酸化蛋白質(zhì)的全面分析，包括對(duì)磷酸化的鑒定、定位和定量。而通常情況下發(fā)生翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在樣本中含量低且動(dòng)態(tài)范圍廣，因而在質(zhì)譜檢測前需要對(duì)發(fā)生修飾的蛋白或肽段進(jìn)行富集。很多富集方法首先在磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)分析中開發(fā)和利用。其中 , 二氧化鈦親和層析 (TiO2) 和磷酸化 Motif 抗體免疫親和富集，兩種方法所獲得的磷酸化修飾肽段彼此互補(bǔ)，能最大限度覆蓋磷酸化修飾位點(diǎn)。

泛素化修飾蛋白組學(xué)

泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾，泛素蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物 80%~85% 的蛋白質(zhì)降解。除此之外，泛素化修飾還可以影響蛋白質(zhì)的定位與活性，參與細(xì)胞周期、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖、分化、信號(hào)傳遞、細(xì)胞凋亡、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動(dòng)的調(diào)控。泛素化修飾蛋白組學(xué)利用對(duì)泛素化賴氨酸（K-GG）具有高親和力的基序抗體，特異性富集復(fù)雜樣本中的泛素化肽段，結(jié)合LC-MS/MS高分辨質(zhì)譜蛋白質(zhì)定量方法，實(shí)現(xiàn)大規(guī)模泛素化蛋白質(zhì)的定性定量分析。

糖基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)

糖基化修飾是一種常見的蛋白翻譯后修飾，糖基化在生物體內(nèi)起著重要的作用。糖基化修飾不僅影響著蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象、生物活性，在分子識(shí)別、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物過程中也發(fā)揮著重要的作用。糖蛋白根據(jù)其糖鏈結(jié)構(gòu)及糖基化位點(diǎn)主要有 N- 糖蛋白與 O- 糖蛋白兩大類。N-糖基化（N-linked glycosylation）是糖鏈通過與蛋白質(zhì)的天冬酰胺的自由NH2基共價(jià)連接形成的，O-糖基化(O-linked glycosylation)是糖鏈與蛋白質(zhì)的絲氨酸或蘇氨酸的自由OH基共價(jià)連接, O-糖基化位點(diǎn)沒有保守序列,糖鏈也沒有固定的核心結(jié)構(gòu),組成既可是一個(gè)單糖,也可以是巨大的磺酸化多糖,因此與N-糖基化相比，O-糖基化分析會(huì)更加復(fù)雜。目前常用的糖蛋白分離富集技術(shù)有以下五種：凝集素親和技術(shù)、肼化學(xué)富集法、硼酸法、免疫法, 親水相互作用色譜法（HILIC）。

送樣要求

●蛋白量不少于800ug，樣品收集過程中盡量加入修飾類抑制劑；

●樣品-80℃保存，避免凍融，寄送時(shí)請(qǐng)保證干冰量充足；

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