目前，DIA 技術(shù)作為蛋白質(zhì)組學定量技術(shù)的主流之選，其運用獨特的 Data Independent Acquisition（數(shù)據(jù)非依賴采集）技術(shù)來采集數(shù)據(jù)。相較于傳統(tǒng)的數(shù)據(jù)依賴掃描模式（DDA），DIA 方法展現(xiàn)出卓越的特性。它擁有更出色的重復性，能確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定與可靠；具備更高的蛋白覆蓋率，如同編織了一張更為細密的網(wǎng)，捕捉更多蛋白質(zhì)信息；還擁有令人稱贊的定量準確度。也正因如此，在諸如標志物研究、疾病精準分型以及品系比較等需要大規(guī)模樣本分析的領域中，DIA 成為了科研人員優(yōu)先考量的前沿技術(shù)?。
產(chǎn)品定義
DIA 技術(shù)是目前主流的蛋白質(zhì)組學定量技術(shù)，它采用DIA（Data Independent Acquisition，數(shù)據(jù)非依賴采集）技術(shù)進行數(shù)據(jù)采集，將整個質(zhì)譜掃描質(zhì)量范圍分為若干小窗口，依次對每個窗口的所有離子進行碎裂，使其能夠?qū)呙鑵^(qū)間內(nèi)的所有肽段離子進行高速一級 MS 掃描再進行二級 MS/MS 分析。因此，DIA 能夠?qū)碗s樣品中幾乎所有可檢測的分子進行定量測定。 DIA 綜合了 shotgun proteomics 高通量檢測的特點與精準定量分析的優(yōu)勢，是真正意義上的全掃描質(zhì)譜檢測手段。
技術(shù)路線
DIA先提取樣品中總蛋白，取出一部分做蛋白濃度測定及 SDS-PAGE 檢測，另取部分進行胰蛋白酶酶解，對酶解肽段除鹽之后，對樣品進行 LC-MS/MS 鑒定。LC-MS/MS 鑒定分為兩個主要步驟，第一步采用傳統(tǒng)的 DDA 方法建立蛋白譜圖庫或者直接使用軟件搜庫，第二步采用 DIA 技術(shù)采集每個樣品的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，在 DDA 數(shù)據(jù)庫的基礎上進行譜圖匹配、定量信息的提取以及后續(xù)統(tǒng)計分析等。
技術(shù)優(yōu)勢
與其它傳統(tǒng)定量技術(shù)相比，DIA 技術(shù)具有非常明顯的優(yōu)勢。
1）與 Label-free（非標記定量）技術(shù)相比：
Label-free 技術(shù)采用的是 DDA 數(shù)據(jù)采集模式，因而其具有 DDA 固有的缺陷——低豐度蛋白鑒定重復性差，Cycle Time 變化大等；而且 Label-free 采用 MS1 質(zhì)譜信息進行蛋白質(zhì)定量，易受基質(zhì)干擾，定量結(jié)果準確性較差。
2）與 ITRAQ/TMT 技術(shù)相比：
ITRAQ/TMT技術(shù)采用的也是 DDA 數(shù)據(jù)采集模式，同樣具有 DDA 固有的缺陷；同時 ITRAQ/TMT 技術(shù)在樣本基質(zhì)復雜時，易受到其他多肽的報告離子的干擾，導致定量結(jié)果存在比值壓縮的缺點， 定量結(jié)果準確性不高。
與數(shù)據(jù)依賴掃描模式（DDA）相比，DIA方法具有更好的重復性、更高的蛋白覆蓋率和定量準確度，特別適用于大樣本的研究?。
應用領域
01
藥物研發(fā)?
DIA技術(shù)可用于藥物代謝動力學研究、藥物靶點鑒定和藥物劑量優(yōu)化，提高藥物研發(fā)效率和準確性?。
02
疾病研究?
在癌癥研究中，DIA技術(shù)可揭示腫瘤細胞的變化及其對治療的響應，同時也可用于研究其他疾病的生物標志物和蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡?。
03
生物醫(yī)學研究?
DIA技術(shù)有助于理解修飾在細胞功能和疾病發(fā)生發(fā)展中的作用機制，為生物醫(yī)學領域的發(fā)展做出貢獻?。
結(jié)果展示
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